Анализ игх молочной железы расшифровка. ИГХ (иммуногистохимия) при раке молочной железы: нормы и расшифровка Игх исследование как делают

Иммуногистохимия – это специальный анализ для определения ракового заболевания. С его помощью находят антигены, выделяемые определённым видом раковых клеток. Вдобавок с помощью иммуногистохимии прослеживается реакция антигенов на лечение. Анализ составляет основу диагностики и терапии в современной онкологии.

В названии метода соединились три отрасли – иммунология, гистология и химия. Для анализа используют химические вещества. Реактивы насыщены антителами, находящими раковые антигены. Антитело – это белок, его структура притягивает антиген. Белок окрашивают ферментами, красителями, которые проявляются при положительной реакции.

Теоретические основы иммуногистохимии заложены в 40-е годы 20-го века. С помощью флуоресценции находили антигены в замороженных клетках. Затем стали использовать окрашенные ферментами антитела. Установили соответствия цветовой реакции и типа раковых клеток. Также определили гормоны и их рецепторы.

Практическое применение методов ИГХ:

Определение типа клеток;
Изучение секреторных внутриклеточных процессов и особенностей клеточного синтеза;
Определение гормонов и гормональных рецепторов.

Прямой метод – маркированные антитела соединяются с искомыми антигенами.
Непрямой, «антиген-антитело» – неотмеченные антитела находят антигены, потом их соединения обнаруживают вторичные отмеченные антитела.

Цвет реакции показывает статус опухоли.

Цель метода

Иммуногистохимическое исследование отвечает на три вопроса.

Что это такое

Специфический анализ помогает выяснить строение раковой клетки и идентифицировать по гистологическим признакам, к какому классу относится новообразование.

Где оно находится

Если точная локализация опухоли неизвестна, с помощью иммуногистохимии находят расположение по метастазу.

Как это лечить

С помощью анализа видна реакция антигенов на вещества препаратов химиотерапии. Так удаётся оценить, окажется ли действенным лечение указанным способом. Установить, к каким препаратам рак устойчив, можно прежде, чем химия попадет в организм человека. Таким образом, пациента избавляют от лишней интоксикации, а сразу назначают лекарство, о действенности которого заведомо известно. Если рак устойчив к химиотерапии, предстоит выбрать другой метод лечения.

Это помогает в лечении эстрогенозависимых опухолей при раке молочной железы.

Сложная структура железистых клеток включает признаки новообразований различной степени агрессивности. Эти опухоли бывают устойчивыми к химиотерапии и гормонам. Насколько агрессивно развивается опухоль, возможно установить по маркеру пролиферации в иммуногистохимическом тесте.

Как проходит процедура

На иммуногистохимический анализ попадает образец ткани, взятый с помощью биопсии. Это способ забора биоматериала с помощью тонкой иглы. Её вводят в тело пациента и шприц-системой втягивают ткань опухоли. Образец проходит подготовку:

Фиксация с помощью парафина.
Изготовление срезов.
Распределение срезов по стеклам.
Обработка образцов антителами и красителями.

Перед исследованием биоматериал хранится в формалине. Это позволяет использовать единственный образец долгое время, чтобы не травмировать пациента. Биопсия бывает болезненна, если опухоли расположены в труднодоступных местах. Злокачественные образования в головном мозге по возможности удаляют оперативно, на анализ попадает непосредственно опухоль. Важно сохранить материал, так как опухоли бывают размером до 1 см. По результатам теста строится программа лечения. Впрочем, в этом случае иммуногистохимия обладает преимуществом.

Положительные и отрицательные стороны

Преимущества метода:

Требуется минимум биоматериала и реактивов;
Определяет рак на ранней стадии;
Быстрый результат;
Точность и достоверность.

Дополнительное преимущество – в возможности трехмерного моделирования. Ответная реакция на антитела видна через три часа. Окончательное заключение дается через 7-10 дней. По истечении этого времени будет точно установлен тип рака и стадия заболевания, а также его первичный очаг. Изменение цвета маркеров обычно не имеет разночтений при постановке диагноза. На итоговом бланке прописывают расшифровку результатов.

Достоверность зависит от метода окрашивания образца реактивами. Это делается автоматически и вручную. При ручном методе не исключён человеческий фактор, ошибки лаборантов. Лечащий врач подскажет, в какую лабораторию обратиться. Пациент может самостоятельно поинтересоваться, как проводится анализ в конкретном учреждении. Для достоверности результата он может проводиться повторно или в двух лабораториях.

Погрешность в результате возникает по вине пациента. Перед биопсией следует отказаться от гормональных препаратов и других лекарств, от физических нагрузок, придерживаться диеты. Внешние факторы влияют на результаты.

Применение метода в диагностике

Показания к анализу:

Патологии репродуктивной системы, бесплодие;
Активный опухолевый рост любой локализации.

Противопоказаний к анализу нет. Порой невозможно получить биоматериал для исследования из-за расположения опухоли.

Иммуногистохимия эндометрия – важное исследование для нахождения причин бесплодия. Его цель – найти антиспермальные клетки, препятствующие оплодотворению. Причиной бесплодия становится нечувствительность эндометрия к гормонам во время овуляции. При этом показатели гормонального фона в норме, антиспермальных тел нет. Иммуногистохимическая диагностика выявляет, что проблема в рецепторах эндометрия.

Трудно поддаются диагностике тимомы. Их деление на злокачественные и доброкачественные условно. Всё зависит от конкретного случая. Статус опухоли вилочковой железы, тимуса показывает исследование на антитела.

ИГХ при раке прямой кишки применяется, чтобы установить эпителиальный или эндокринный характер опухоли, наследственный фактор и прогноз. Методика определяет первичное ли заболевание и метастазы.

Расшифровка результатов основана на показателе степени злокачественности. Чем он выше, тем менее благоприятный прогноз. Патология – 85% содержания маркера, означает последнюю стадию заболевания с метастазами. Менее 10% – норма, благополучный исход лечения.

Другие маркерные методы

Онкологический диагноз всё же редко ставят по результатам единственного исследования.

Гистологический

Второй информативный анализ – гистология. Метод отличается от иммуногистохимии тем, что даёт представление только о клеточном строении. Гистологическим способом выделяют в одном материале несколько различных структур, к примеру, аденокарциномы. Злокачественное образование формируется из железистой ткани, которое выделяет жидкость. Исходя из типа жидкости, выделяют серозную и слизисто-секреторную. Клетки аденокарцином располагаются фолликулярно или папиллярно. Опухоль бывает твердой или с включениями цист, и уже классифицируется как цистаденокарцинома. Об этих характеристиках узнают по результатам гистологического исследования и корректируют лечение под конкретный тип опухоли.

Технология такая же, как при иммуногистохимии. Берут материал с помощью биопсии, покрывают парафином и разрезают образец на тонкие пластины. Готовые препараты также окрашивают, после чего патоморфолог изучает их под микроскопом.

Недостатки гистологического исследования – длительные сроки ожидания результата планового анализа, 10-14 дней. Срочный анализ делают за 30 мин.

Метод МГМ

Ещё один анализ, в основе которого лежит реакция на маркеры – молекулярно-генетический. Помогает установить отклонения в ДНК злокачественной опухоли, влияющие на её метастатическую и инвазивную активность, а также наличие наследственной предрасположенности или спорадической, спонтанной природы образования.

Гистология и иммуногистохимия – два основных метода постановки диагноза при раке, подтверждающие друг друга. Разница в результатах редка, так как иммуногистохимия включает исследование клеточного строения.

Часто после гистологического исследования лимфоузла пациента дополнительно направляют на иммуногистохимию. Под микроскопом материал изучает эксперт, который может что-то упустить. Либо структуру сложно идентифицировать. Метод ИГХ – помощь в спорной ситуации.

Лаборатории и стоимость

В России есть лаборатории, где можно сделать тест на иммуногистохимию.

Лаборатория компании «ЮНИМ», Инновационный центр Сколково, Москва – 28300 р. любой сложности, 19000 при раке молочной железы, срок 3 дня.

Лаборатория «Мелайн-Сервис», Москва:

6560 р. анализ на 1 антитело;
15980 р. анализ мягкотканных опухолей 6-10 антител;
27350 р. сложный анализ на 11-14 антител;
12620 р. – стандартное исследование молочной, предстательной железы, определение статуса эндометрия, 2-5 антител.

Центр молекулярной диагностики в Москве и с филиалами в регионах РФ:

5170 р. – 1 антитело;
12500 р. – 5 антител;
24000 р. – 10 антител.

Стоимость зависит от сложности исследования и вида рака.

Онкологические заболевания бывают самой страшной явью для абсолютного большинства людей. Но чтобы вовремя выявить серьезную проблему и начать от нее эффективно избавляться, необходимо проводить специальные обследования. Одно из них - ИГХ- исследование.

Гены, рецепторы и факторы роста

Точные причины, которые заставляют клетки активно делиться, образуя новообразования, зачастую имеющие онкологическую направленность, науке до сих пор неизвестны. Но вот то, как происходит рост клеток, уже достаточно хорошо изучено. Клетки тканей имеют сложную структуру. На поверхности клетки есть так называемые HER-2 -рецепторы. Они служат своеобразными антеннами, слушающими команды организма. Кстати, аббревиатура HER-2 берет начало от английского словосочетания human epidermal growth factor receptor 2 , что в дословном переводе значит "рецептор человеческого Эти-то рецепторы и заставляют клетку делиться, расти или самовосстанавливаться.

Активная работа рецептора и опухоль

К сожалению, не всегда организм человека работает так, как должно быть в идеале, без сбоев и болезней. Пока наука точно не знает, почему, но случается так, что HER-2 -рецепторы начинают активно получать команды "делиться и размножаться". А так как эти клеточные элементы очень исполнительные, то они заставляют клетки активно делиться, образуя опухоль. Только медицинские обследования, в том числе и ИГХ-исследование, позволяют определить статус новообразования, а также прогноз для лечения и жизни пациента.

Генный статус опухоли

Онкологические образования современной медициной определятся по статусу влияния гормональной терапии. может быть отрицательным (негативным) и Конкретизировать характер новообразования помогает ИГХ-исследование. Что показывает иммуногистохимия? Данное исследование помогает установить гормональную зависимость новообразования - герцепт-статус, а значит, правильно выбрать методику лечения, чтобы получить действенный результат.

Негатив и позитив

То, что гормональный герцепт-статус опухоли носит названия "положительный" или "отрицательный", много расскажет грамотному врачу. Но вот сами по себе эти определения не относятся к эмоциям, как может подумать простой обыватель, впервые услышавший об ИХГ-исследовании. Выявленный положительный герцепт-статус говорит о том, что этот тип онкологического заболевания имеет более агрессивный характер, он быстрее развивается, распространяясь по организму путем метастазирования. Но в то же время такая злокачественная опухоль с высоким уровнем вероятности откликнется на определенные виды лекарственных препаратов. Отрицательный герцепт-статус новообразования расскажет, что опухоль развивается медленно, но вот адекватного медикаментозного лечения для нее пока что нет.

Иммуногистохимия - что это?

Одно из самых распространенных онкозаболеваний среди женщин - рак молочной железы. ИГХ-исследование помогает определить тип новообразования и подобрать лечение в соответствии со сложившейся ситуацией. Иммуногистохимия - это биоптата (биоматериала, взятого в процессе биопсии) при помощи специального окрашивающего вещества. Это вещество окрашивает HER-2 -рецепторы, и чем больше рецепторов, влияющих на появление и развитие "ненормальной" клетки, тем ярче будет окраска исследуемого биоматериала.

Как определяется статус новообразования?

Окрашенный биоматериал во время лабораторного исследования на определение герцепт-статуса подвергается визуальному исследованию. для этого прилагается специальная шкала, имеющая градиентную окраску от 0 до 3+. Этот способ позволяет различить 4 основных порога, в зависимости от которых предполагается вести больного дальше. Кажется - что проще? Окрасить исследуемые ткани при помощи специального вещества, разместить под микроскопом, тщательно рассмотреть, сравнивая увиденное с контрольными цветными образцами, и установить герцепт-статус опухоли. Но здесь огромную роль играет человеческий фактор, особенности освещения и так далее.

Как проводится ИГХ-исследование

При подозрении на онкологическое заболевание проводится исследование молочной железы. Расшифровка содержит всего четыре порога. Но проблема в том, что средние два значения, а это будет 1+ и 2+ по шкале, предполагают неясный результат, требующий дополнительного исследования другим методом. То есть ИГХ-исследование - наиболее неоднозначный метод выявления герцепт-статуса новообразования. К тому же на результат исследования активно влияют, как уже упоминалось, человеческий фактор и внешние обстоятельства. Единственное, что наиболее точно определяются два крайних результата - отрицательный 0 (новообразование имеет отрицательный герцепт-статус) и 3+ (гормональный статус опухоли положительный).

Женские гормоны и опухоли

Как говорит современная медицина, большинство опухолей женской половой сферы являются зависимыми от гормонального уровня организма. На их развитие активно влияют женские половые гормоны - прогестерон и эстроген. Рецепторы к этим гормонам определяют образование и развитие онкозаболевания. Установленная гормональная зависимость позволяет достаточно четко определить схему лечения с последующими жизненным прогнозом. К тому же эти рецепторы играют свою роль не только в онкологических заболеваниях молочных желез, но и в таких серьезных проблемах, как женское бесплодие, эндометриоз и раковые болезни половой сферы - матки, яичников, шейки матки. Герцепт-статус опухоли, который устанавливается во время ИГХ-исследование эндометрия, например, позволит назначить лечение именно теми препаратами, которые помогут добиться адекватного результата без излишних экспериментов с подбором лекарственных средств в каждом конкретном случае.

Если бесплодие

Бесплодие - огромная проблема для многих современных семей. Проведенные научными медицинскими учреждениями исследования показали, что в достаточно большом количестве случаев бесплодие бывает обусловлено недостатком гормонального фона эндометрия - эпителиального слоя, выстилающего полость матки. Именно герцепт-статус и позволяет выявить ИГХ-исследование рецептивности эндометрия. Женские половые гормоны - активные участки процесса формирования яйцеклетки, ее оплодотворения, имплантации эмбриона в полость матки, а также последующего вынашивания беременности и родов. ИХГ-исследование эндометрия, как мы уже сказали, позволяет выявить герцепт-статус клеток эндометрия к эстрогену и прогестерону и в соответствии с полученными результатами подобрать для женщины правильное лечение.

Диагностика лимфомы

Онкологические заболевания - беда человечества. Хотя современная фармакология и технические разработки позволяют излечиваться от этих болезней. Но здесь очень важна диагностика, особенно на ранних стадиях заболевания. Онкология лимфы - достаточно распространенная беда. ИГХ-исследование при лимфоме - один из способов поставить точный диагноз, чтобы затем назначить адекватную терапию. Данное исследование проводится на биоптате лимфатической жидкости или ткани системы кроветворения. Взятый для исследования материал подвергается окрашиванию специальным веществами, помогающими определять онкомаркеры. К сожалению, этот вид исследования несовершенен и в большинстве случаев дополняется другими методами диагностики. К тому же часто не сама лимфатическая система становится причиной проблемы. Именно это и позволяет выявить ИГХ-исследование лимфы.

ИГХ-анализ - своевременное знание

Проблемы со здоровьем должны быть вовремя обнаружены и идентифицированы. Для этого-то и нужны всевозможные методы обследований, анализы. ИГХ- исследование - один из наиболее распространенных методов диагностики новообразований или других проблем с тканями различных органов. Исследование ИГХ проводится на взятом для определения проблемы материале - так называемом биоптате. Материал окрашивается специальными веществами для каждой конкретной цели, и с помощью визуального сравнения, проводимого врачом-гистологом, устанавливаются онкомаркеры, показывающие ту или иную проблему. Несовершенство иммуногистохимического исследования состоит в том, что материала может быть недостаточно, сыграет свою роль человеческий фактор, или же внешние причины не позволят установить точную картину проблемы. В любом случае для адекватной диагностики заболевания, тем более онкологического, необходимо проводить целый комплекс обследований, где одной из ступеней будет ИГХ- исследование. Что это такое при раке какого-ибо органа, ткани? Биоптат исследуется на онкомаркеры, позволяющие оценить их наличие в образце. Как помощь в постановке диагноза ИГХ-исследование незаменимо, также оно активно используется в установлении причин женского бесплодия.

Медицина, и диагностическая в том числе, постоянно развивается. Возможно, в ближайшем будущем иммуногистохимическое исследование будет доведено до совершенства и позволит многим людям поставить адекватный диагноз с наименьшими затратами времени и сил.

[12-027 ] Иммуногистохимическое исследование клинического материала (с использованием 1 антитела)

3300 руб.

Заказать

Исследование клеток ткани, которое проводится с помощью специальных реактивов.

Синонимы русские

ИГХ, иммуногистохимия, иммуногистохимический анализ.

Синонимы английские

Immunohistochemistry, IHС, immunohistochemical analysis.

Метод исследования

Иммуногистохимический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Образец ткани / образец ткани в парафиновом блоке.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Иммуногистохимическое исследование клинического материала проводится в целях выявления в нем искомых веществ. Готовые гистологические препараты обрабатываются специальными реактивами, содержащими меченые специфические антитела к выявляемому веществу, которое в данной ситуации служит антигеном. Если искомое вещество находится в исследуемом материале, то антитело связывается с его определенными участками. В результате этого между ними образуется комплекс и происходит окрашивание ткани.

Данный метод используется в диагностике различных патологических состояний, особенно велика его роль в области онкологии. Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование помогает не только диагностировать опухоль, определить ее нозологический вариант, выявить первичный опухолевый очаг и обнаружить раковое перерождение клеток, но также спрогнозировать варианты течения заболевания и успешность лечения. К факторам, влияющим на прогноз, относятся рецепторы к эстрогенам и к прогестерону, Ki-67 (маркер активности опухоли), her-2 neu (эпидермальный фактор роста, определяет чувствительность опухоли к химиопрепарату трастузумабу/герцептину), VEGF (сосудистый фактор роста), Bcl-2, р53 и др. В отличие от иммуногистохимического анализа, их невозможно определить при обычном гистологическом исследовании.

Также этот метод нашел применение в диагностике системных заболеваний соединительной ткани и болезней почек, позволяет выявлять бактерии и вирусы в изучаемых тканях, например вирус Эпштейна - Барр, папиллома-вирус, Helicobacter Pylori (у больных хроническим гастритом), микобактерии при диагностике туберкулеза и др.

На основе ИГХ-анализа врач получает заключение с положительными и отрицательными маркерами, и это помогает подтвердить или опровергнуть гипотезу других клинико-лабораторных исследований.

Рак шейки матки относится к наиболее распространенным видам рака у женщин. Эпидемиологические и лабораторные данные подтверждают роль человеческого папиллома-вируса (ВПЧ, HPV) в качестве запускающего агента для подавляющего большинства предраковых и злокачественных поражений эпителия слизистой оболочки шейки матки. При этом ДНК ВПЧ могут быть обнаружены в 95-100% всех случаев.

Вирус папилломы человека представляет собой небольшие циркулярные двухцепочечные вирусы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), принадлежащие к семейству Papillomaviridae. Известно более 130 типов ВПЧ. Они классифицируются по степени риска, основанного на их связи с цервикальной карциномой. ВПЧ 16 и 18 являются наиболее часто встречающимися типами высокого риска. Внедряясь в эпителиальные клетки, вирус вызывает в них дефекты генов, тем самым способствуя развитию опухоли. При помощи ИХГ легко обнаружить в клетках, пораженных HPV, экспрессию белков p16 и p18, и их позитивность сильно коррелирует с позитивностью HPV. Это помогает различить неопухолевую дисплазию (как результат воспаления) и опухолевую (вызванную вирусом папилломы и способную переродиться в рак), а также позволяет провести дифференциальную диагностику дисплазии умеренной и высокой степени тяжести (CIN II/III) и начальных форм рака шейки матки, выявление поражений, склонных к прогрессированию и развитию инвазивной карциномы. В дисплазиях умеренной и высокой степени (в 80-100% случаев CIN II и практически во всех случаях CIN III) и инвазивном раке шейки матки определяется усиленная экспрессия белка p16, и она усиливается по мере нарастания тяжести поражения.

У женщин с плоскоклеточными интраэпителиальными поражениями низкой степени тяжести очаговая и диффузная экспрессия свидетельствует о прогрессировании заболевания. Отсутствие или очаговая экспрессия p16 в поражениях высокой степени может служить дополнительным признаком благоприятного течения патологического процесса.

Применяется иммуногистохимическое исследование и при дифференциальной диагностике .

Целиакия – это системное заболевание, обусловленное генетической непереносимостью глютена или соответствующих проламинов, которые содержатся в семенах злаков. Характеризуется данная патология повреждением слизистой оболочки тонкой кишки (развитием атрофической энтеропатии), появлением в сыворотке крови специфических антител и широким спектром глютензависимых клинических проявлений. Заболевание встречается в два раза чаще среди женщин, чем среди мужчин, может впервые проявиться как в детстве, так и у взрослых. Целиакия может протекать с ярко выраженной или со стертой клинической картиной, а также без гастроэнтерологической симптоматики. Чаще всего встречается стертый вариант течения заболевания, поэтому диагностика глютеновой энтеропатии (ГЭ) затруднена.
На первичном лабораторном этапе проводится серологическое исследование, определяющее в крови специфические биомаркеры. Лицам с положительными результатами показана эндоскопия тонкой кишки с биопсией и последующим гистологическим и ИГХ анализом взятого материала.

Известно, что целиакия сопровождается повышением числа лимфоцитов внутри эпителиальных клеток тонкой кишки. При этом отличительной особенностью является то, что большинство интраэпитиальных лимфоцитов (ИЭЛ) несут на своей поверхности специфический Т-клеточный рецептор (CD3 γ и CD3δ-положительные клетки). Чем активнее протекает заболевание, тем больше ИЭЛ. Эта особенность используется при проведении иммуногистохимического исследования, позволяющего определить преобладающий тип лимфоцитов. Особенно важен этот анализ, когда существует расхождение между данными серологического исследования и гистологической оценкой на стандартных участках.

Для чего используется исследование?

Для определения вида и подвида опухоли, степени ее злокачественности и распространенности онкологического процесса;
для дифференциальной диагностики пролиферативных заболеваний;
для определения этиологического фактора, вызвавшего изменения в клетках;
для подбора эффективной терапии;
для оценки пролиферативной активности клеток опухоли;
для оценки эффективности лечения;
для диагностики рецепторного статуса при онкологическом заболевании (например, раке молочной железы, предстательной железы);
для определения первичного очага опухоли;
для выявления злокачественного потенциала пораженных клеток;
для первичного отбора пациентов для диспансерного учета и дальнейшего обследования;

Когда назначается исследование?

При дифференциальной диагностике дисплазии (высокой и умеренной степени) и начальной стадии рака шейки матки;
при раке молочной железы, желудка, предстательной железы в целях определения чувствительности к различным видам терапии;
при определении степени злокачественности и оценки прогноза заболевания;
при оценке эффективности терапии;
при поиске источника метастазов;
при диагностике гастроинтестинальных стромальных опухолей (GIST) с помощью расширенной панели антител, включающей DOG1;
при диагностике нейроэндокринных опухолей;
при дифференциальной диагностике целиакии, сопровождающейся неясной гистологической картиной;
при расхождении результатов серологического исследования и гистологической оценки.

Что означают результаты?

Референсные значения

Диапазон значений индивидуален для каждого заболевания, зависит от используемых антител.

Расшифровка результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом.

Проводится морфологическая оценка препарата (опухоли классифицируются согласно ВОЗ), дается описательный ответ с указанием оценки экспрессии антитела. ИХГ всегда следует использовать в качестве дополнения к морфологическому исследованию, результаты не следует интерпретировать изолированно.

Что может влиять на результат?

При некоторых заболеваниях есть факторы, которые могут влиять на результат. Так, при диагностике целиакии назначение безглютеновой диеты до исследования может приводить к получению ложноотрицательного результата.

Поставить точно диагноз "онкология" без проведения специальных исследований практически невозможно. В настоящее время медицина обладает такими возможностями. Поэтому если имеется подозрение на рак, то проводится иммуногистохимическое исследование. Рассмотрим, что собой представляет данный анализ, в каких случаях назначается и что позволяет выявить.

Сущность исследования

Под данным исследованием подразумевается изучение образца тканей под микроскопом. Их получают при помощи биопсии и предварительно обрабатывают специфическими антителами.

Онкологические заболевания давно находятся в поле зрения врачей и ученых. В ходе многочисленных исследований было установлено, что злокачественные клетки в процессе жизнедеятельности продуцируют специфические белки, которые называют антигенами. Они связываются с антителами, именно на этом основано иммуногистохимическое исследование, когда ткань пациента, взятая для изучения, после обработки тщательно изучается при помощи микроскопии.

Когда антитела взаимодействуют с раковыми клетками, то можно наблюдать явление флуоресценции. Это дает основания практически на 100 % быть уверенным, что имеет место онкология.

Сейчас уже разработаны и активно внедрены в медицинскую практику антитела практически ко всем новообразованиям.

Возможности исследования

Иммуногистохимическое исследование при раке позволяет:

Распознать новообразование и определить его разновидность.
Выяснить распространенность первичного очага по организму.
При взятии биологического материала из вторичных очагов можно определить источник распространения метастазов.
Исследование позволяет оценить эффективность терапии.
При помощи анализа можно выяснить, на какой стадии развития находится раковая опухоль.
Иммуногистохимическое исследование позволяет также выяснить скорость роста новообразований.

Данный метод исследования считается более информативным по сравнению с обычным гистологическим. Если использовать оба метода исследования, то можно получить полнейшую картину, поэтому на практике чаще всего врачи так и поступают.

Показания к проведению исследования

Исследовать при помощи этого метода можно практически все ткани человеческого организма, но чаще всего такой анализ назначают при подозрении на онкологию.

Исследование применяют:

Для определения первичных новообразований.
Для выявления метастазов.
Данный анализ помогает определить прогноз развития и протекания патологии.
Анализ служит одним из методов исследования рецепторов к ряду гормонов.
ИГХ-исследование позволяет обнаружить микроорганизмы.
Метод исследования применяют для выяснения чувствительности раковых клеток к химиотерапии и радиотерапии.

Преимуществом такого метода исследования является также отсутствие противопоказаний. Сложность может возникнуть только в том случае, если раковое образование расположено в труднодоступном месте.

Методика проведения анализа

Иммуногистохимическое исследование проводится в несколько этапов, первым из них является сбор биологического материала. Его получают путем биопсии или изъятия материала во время проведения операции.

Кусочек ткани помещают в формалин и направляют в лабораторию, где его подвергают изменениям:

Материал обезжиривают специальными составами и заливают парафином. В таком состоянии он может храниться практически вечно, поэтому при необходимости исследование можно повторять.
На следующем этапе получают тончайшие срезы — проводят микротомирование. Их размещают на специальных стеклах.
Приготовленные срезы обрабатывают растворами антител определенной концентрации. Использовать для обработки могут составы, содержащие разное количество антител. Какие из них вступят во взаимодействие с раковыми клетками, будет зависеть от разновидности опухоли.

Результаты исследования будут готовы только через одну или две недели.

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы

Такой анализ просто незаменим, если есть подозрение на наличие раковых клеток в груди. Обязательно определение количества рецепторов эстрогена и прогестерона. При их повышении активизируется процесс роста злокачественных клеток.

ИГХ-исследование позволяет не только распознать онкологическое заболевание, но и определить его стадию. При помощи исследования врачи выясняют, показана ли гормональная терапия.

Опухоли, имеющие большую концентрацию гормонов, чаще всего вполне эффективно лечатся антигормональными препаратами.

Во время проведения анализа обязательно определяют показатель Ki-67, он помогает определить злокачественность процесса. Если иммуногистохимическое исследование молочной железы показывает Ki-67 до 15 %, то исход заболевания считается благоприятным. Если показатель доходит до 30 %, то без химиотерапии не обойтись, потому что опухоль растет довольно быстро. Отметка в 90 % чаще всего свидетельствует о неизбежности летального исхода.

Данный анализ назначается не только при подозрении на онкологию груди, но еще он оказывается довольно информативным, если:

Имеется бесплодие.
Обнаружены злокачественные образования матки.
Наблюдаются патологические изменения в репродуктивной системе.

Иммуногистохимическое исследование эндометрия

Такой анализ проводится, если:

Часто наблюдаются выкидыши.
У женщины было несколько неудачных попыток ЭКО.
Диагностирована хроническая форма эндометрита.

Данное исследование помогает выяснить, имеются ли клетки, мешающие зачатию естественным путем.

ИГХ-исследование тканей эндометрия назначается женщинам, у которых уже было несколько неудачных попыток искусственного оплодотворения.

Взятие тканей эндометрия проводится в разные дни цикла, которые назначает врач.

Интерпретация результатов анализа

Необходимо иметь в виду, что исследовать подготовленные образцы тканей имеет право только врач, имеющий сертификат, подтверждающий специальную подготовку по проведению анализов по методу ИГХ.

В заключении должно быть указано:

Показатели антител, к которым определена тропность исследуемой ткани.
Указывается разновидность раковых клеток и их количество.
Указываются выявленные антигены, которые помогают установить вид онкологии.

По результатам исследования нельзя ставить окончательный диагноз. Врач-онколог имеет право это сделать только после получения интерпретации всех диагностических процедур.

Таким образом, можно сделать вывод, что эффективно иммуногистохимическое исследование при раке молочной или других желез и других видах онкологии. Анализ дает исчерпывающую информацию и позволяет распознать начинающийся патологический процесс на клеточном уровне.

Стандартизованное иммуногистохимическое исследование: рецепторный статус при раке молочной железы (PR, ER, ki67, Her2 neu). Выполняется только при наличии готового микропрепарата на предметном стекле и образца ткани в парафиновом блоке.

Синонимы русские

ИГХ-исследование (РЭ, РП, Her2/neu, Ki-67), иммуногистохимический анализ рецепторного статуса рака молочной железы.

Синонимы английские

IHC (ImmunoHistoChemistry) Test for Breast Cancer Receptor Status (ER, PR, HER2, Ki67), HER2 Overexpression by IHC, Estrogen Receptors, Progesterone Receptors, ER and PR Status, Estrogen and Progesterone Receptor Status.

Метод исследования

Иммуногистохимический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Парафиновый блок с биоптатом образования молочной железы. Ткань первичной опухоли может быть получена с помощью толстоигольной биопсии, а также инцизионных и эксцизионных хирургических вмешательств. Для выявления метастазов на биопсию могут быть взяты ткани из стенки грудной клетки, регионарных лимфоузлов или отдаленных органов.

Общая информация об исследовании

Современные принципы и стратегии лечения рака молочной железы основываются, в том числе, на результатах оценки рецепторного статуса и пролиферативного потенциала опухолевых клеток. Клетки опухоли обладают способностью вырабатывать и располагать на своей поверхности специальные белки – рецепторы, стимуляция которых приводит к запуску клеточного деления и росту опухоли. Подобные рецепторы способны связываться с веществами, присутствующими в организме в норме и исходно никак не связанными с развитием злокачественного новообразования. Согласно актуальным клиническим рекомендациям, для рака молочной железы имеет значение наличие на опухолевых клетках следующих рецепторов, различные комбинации которых называются рецепторным статусом:

Рецепторы к гормонам – эстрогенам и прогестерону (ER, PR ). Значительная часть опухолей молочной железы является гормонально-зависимыми, то есть их рост поддерживается и стимулируется эстрогенами и прогестероном. Опухоли с положительным гормональным рецепторным статусом хорошо отвечают на терапию аналогами гормонов (тамоксифен), которые блокируют соответствующие рецепторы – связываются с ними, но не вызывают активации внутриклеточных процессов и не дают рецептору впоследствии связаться с гормоном. Таким образом, исследование продукции опухолью ER и PR позволяет определить ее чувствительность к этим препаратам.

Рецептор второго типа к человеческому эпидермальному фактору роста (human epidermal growth factor receptor 2 – HER2/neu ). В клетках некоторых опухолей молочной железы имеет место повышенная выработка данного рецепторного белка, который, соединяясь с естественным фактором роста, запускает в опухолевой клетке процесс деления. Общее число пациенток с HER2-положительным раком молочной железы составляет от 15% до 20%. Определение HER2/neu имеет не только прогностическое значение (такие опухоли обычно прогрессируют быстрее и имеют более агрессивное клиническое развитие), но и позволяет оценить возможность применения таргетных лекарственных препаратов – моноклональных антител к рецептору HER2 – трастузумаб (герцептин), лапатиниб, пертузумаб. Кроме того, HER2-позитивные опухоли резистентны к тамоксифену.

Пролиферативная активность – показатель способности опухолевых клеток к неограниченному делению, которое является основным фактором биологической агрессивности опухоли. Процесс деления сопровождается появлением в клетке определенных белков, один из которых – Ki-67 . Он не продуцируется в клетках в состоянии покоя, что позволяет использовать его как маркер пролиферативной активности опухоли. Определение уровня Ki-67 имеет важное прогностическое значение, так как наибольшей пролиферативной активностью обладают опухоли из наименее зрелых и дифференцированных клеток.

Все указанные выше маркеры могут быть выявлены при иммуногистохимическом исследовании биоптата или операционного материала опухоли. Для анализа из готового парафинового блока с помощью специального микроножа нарезают тончайшие срезы, которые затем прикрепляют к предметным стеклам и красят рутинными красителями, чтобы было возможно отличить клетки друг от друга и от межклеточного вещества. Затем срезы на стеклах окрашиваются растворами антител, меченных флюоресцирующими метками, специфичных к одному из исследуемых рецепторов. Если в опухолевой клетке присутствует искомый рецептор, антитела связываются с ним и при просмотре стекла под специальным микроскопом можно увидеть флюоресценцию, что будет свидетельствовать о положительном результате теста. Кроме того, при просмотре среза врач-морфолог сможет увидеть, что окрашенный маркер располагается в ядре, клеточном веществе или на оболочке опухолевых клеток. Количество применяемых растворов с антителами соответствует количеству маркеров, которые исследуются в образце. Степень флюоресценции и процент клеток, в которых она есть, лежат в основе интерпретации результатов иммуногистохимического анализа и подробнее описаны в соответствующем разделе.

Для чего используется исследование?

Для определения гормонорецепторного статуса и степени пролиферативной активности рака молочной железы для оценки прогноза и индивидуализации лечения, в том числе определения показаний для назначения таргетной терапии.
По результатам детекции гормональных рецепторов определяется целесообразность использования антиэстрогенов, а рецептора HER2 – таргетных анти-HER2 препаратов. Выявленное отсутствие этих маркеров позволяет избежать назначения заведомо неэффективной терапии. Высокий индекс пролиферативной активности, а также негативность по рецепторному статусу по большей части являются показанием для добавления к лечению цитостатических препаратов.

Когда назначается исследование?

При наличии гистологически верифицированного рака молочной железы - впервые выявленные, рецидивирующие и метастатические опухоли.

Что означают результаты?

При интерпретации результатов иммуногистохимического определения рецепторного статуса стероидных гормонов (эстрогенов и прогестерона) в опухолях молочной железы следует оценивать не только процент окрашенных антителами клеток, но и интенсивность окрашивания. Оба эти параметра учитываются в шкале Allred, где процент позитивных клеток оценивается от 0 до 5 баллов, а интенсивность окрашивания от 0 до 3. Сумма двух показателей является итоговым баллом, по которому определяется позитивность опухоли по рецепторному статусу: 0-2 негативная, 3-8 позитивная. Общий балл 3 по этой шкале соответствует 1-10% окрашенных клеток и является минимальным позитивным результатом, когда назначение гормональной терапии может иметь эффективность.

Иногда рецепторный статус определяется исключительно по проценту клеток с окрашенными ядрами. В таких случаях NCCN рекомендует считать позитивными все опухоли, где есть более 1% позитивных клеток.

При интерпретации окраски на рецептор HER2/ neu учитывают только мембранное окрашивание (окрашивание клеточной оболочки), которое оценивают по шкале от 0 до +3:

результат 0 и +1 считается HER2-негативным;

2 – пограничный результат, при нем по данным иммуногистохимического исследования нельзя судить о наличии на поверхности клеток рецептора HER2-neu, необходимо проведение FISH- или CISH-исследования;

3 – положительный результат – таргетная терапия анти-HER2 препаратами будет эффективна.

Согласно классификации St. Gallen Consensus (2009), низким индексом пролиферативной активности считается уровень Ki-67 менее 15%, средним – 16-30%, а высоким – более 30%.

Что может влиять на результат?

Качество предоставленных парафиновых блоков, опыт и квалификация врача-патоморфолога, так как иммуногистохимический метод не в полной мере стандартизирован и оценка его результатов в некоторой степени субъективна.
Интерпретация результатов исследования должна проводиться исключительно врачом соответствующей специальности, приведенные данные об эффективности и целесообразности назначения определенных лекарственных средств в зависимости от результатов исследования носят исключительно рекомендательный характер и могут быть пересмотрены с учетом индивидуальных особенностей пациентки.

Важные замечания

При неопределенном HER2/neu-рецепторном статусе (результат иммуногистохимического исследования 2+) рекомендуется выполнение FISH- или CISH-исследования, которые позволят выявить гиперактивацию гена, кодирующего этот рецептор. При недоступности этих исследований допускается повторное иммуногистохимическое исследование, но на другом образце опухолевой ткани.
Существует несколько шкал оценки рецепторного статуса рака молочной железы, в лабораторном отчете должно быть указано, по какой именно проводилась оценка позитивности опухоли в данном исследовании, а также дана описательная характеристика количества позитивных клеток, особенностей окрашивания клеточных структур и морфологических особенностей клеток.

Гистологическое исследование биопсийного материала образования молочной железы

Цитологическое исследование пунктатов молочной железы

Определение HER2 статуса опухоли методом FISH

Определение HER2 статуса опухоли методом CISH

Кто назначает исследование?

Онколог, маммолог, онкогинеколог.

Литература

Dana Carmen Zaha. Significance of immunohistochemistry in breast cancer. World Journal of Clinical Oncology, 2014; 5(3): 382-392.

NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology: Breast Cancer. Version 3.2017 – November 10, 2017. Available at www.nccn.org.

Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2 т. – T. I / Под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. С. 658-660.

В. Ф. Семиглазов, Р. М. Палтуев, В. В. Семиглазов, Г. А. Дашян, Т. Ю. Семиглазова, П. В. Криворотько, К. С. Николаев. Общие рекомендации по лечению раннего рака молочной железы St. Galle- 2015, адаптированные экспертами Российского общества онкомаммологов. Опухоли женской репродуктивной системы, 2015; 3: 43-60.